બ્લડ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કિટ

નિષ્કર્ષણ વિના નમૂના તરીકે લોહીનો સીધો ઉપયોગ કરીને લક્ષ્ય જનીનનું ઝડપી વિસ્તરણ.

આ કીટ માનવ જિનોમમાં સિંગલ-કોપી જનીનોને અસરકારક રીતે વિસ્તૃત કરવા માટે આનુવંશિક રીતે એન્જિનિયર્ડ એન્ટી-ઇન્હિબિટર ડીએનએ પોલિમરેઝ અપનાવે છે. આ કિટમાં સારી રીતે optimપ્ટિમાઇઝ કરેલ બફર સિસ્ટમ પોલિમરેઝને PCR અવરોધકોના નિષેધનો મજબૂત રીતે પ્રતિકાર કરવામાં મદદ કરે છે, આમ લોહી અને સંસ્કારી કોશિકાઓનો નમૂના તરીકે સીધો ઉપયોગ કરીને DNA ને વિસ્તૃત કરી શકે છે. આ ઉત્પાદન ચલાવવા માટે સરળ છે અને તેને ડીએનએ શુદ્ધિકરણ અથવા નમૂના પ્રીટ્રીટમેન્ટ જેવા જટિલ પગલાંની જરૂર નથી.
આ કીટ 2 × MasterMix તરીકે પૂરી પાડવામાં આવે છે, અને પ્રતિક્રિયા ફક્ત બ્લડ ટેમ્પલેટ અને અનુરૂપ ડિટેક્શન પ્રાઇમર્સ ઉમેરીને કરી શકાય છે. તે સસ્તન પ્રાણીઓના સંસ્કારી કોષો જેમ કે મનુષ્યો, ઉંદર, ભૂંડ, cattleોર અને અન્ય પ્રજાતિઓ પર લાગુ કરી શકાય છે, તેમજ તાજા અથવા 4 ℃ ક્રાયોપ્રેઝ્ડ આખા લોહી, એન્ટીકોએગ્યુલન્ટ (EDTA, સાઇટ્રેટ, હેપરિન), લિક્વિફાઇડ બ્લડ ક્લોટ્સ અને ડ્રાય બ્લડ સ્પોટ્સ Whatman 903 અને FTA Elute કમર્શિયલ કાર્ડ્સ પર સંગ્રહિત.

બિલાડી. ના	પેકિંગ માપ
4992529	20 µl × 100 rxn
4992530	20 µl × 500 rxn

અમને ઇમેઇલ મોકલો

ઉત્પાદન વિગત

પ્રાયોગિક ઉદાહરણ

પ્રશ્નો

ઉત્પાદન ટ Tagsગ્સ

વિશેષતા

■ સરળ અને ઝડપી: નમૂનાની તૈયારી અને ડીએનએ નિષ્કર્ષણના કંટાળાજનક પગલાઓની જરૂરિયાત વિના, પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશન લોહીનો નમૂના તરીકે સીધો ઉપયોગ કરી શકાય છે.
■ ઉચ્ચ શુદ્ધતા: નમૂનાની પૂર્વ-સારવાર અને ડીએનએ નિષ્કર્ષણ પગલાંની અવગણના નમૂનાઓના ક્રોસ-દૂષણને ટાળવા માટે મદદ કરી શકે છે.
Through ઉચ્ચ થ્રુપુટ: મોટા પાયે નમૂનાઓ માટે પીસીઆર ઓળખ 96/384-સારી પીસીઆર પ્લેટ સાથે કીટને જોડીને કરી શકાય છે.
Univers મજબૂત સાર્વત્રિકતા: આ કિટ જટિલ ગૌણ માળખા સાથે ઉચ્ચ GC ટુકડાઓ અથવા ટુકડાઓને અસરકારક રીતે વિસ્તૃત કરી શકે છે, અને વિસ્તરણની લંબાઈ 5 kb સુધીની હોઈ શકે છે.
Stress મજબૂત તણાવ પ્રતિકાર: આ કીટ વિવિધ પ્રજાતિઓ અને લોહીના નમૂનાઓ માટે અલગ અલગ રીતે સચવાય છે.

અરજીઓ

આ કીટના PCR ઉત્પાદનોમાં 3 A-એન્ડમાં "A" હોય છે, જેનો સીધો ઉપયોગ TA વેક્ટર ક્લોનિંગ માટે કરી શકાય છે. આ કીટનો ઉપયોગ જીનોમિક ડીએનએ ટુકડાઓના વિસ્તરણ, ઉચ્ચ-થ્રુપુટ આનુવંશિક વિશ્લેષણ અને જીનોટાઇપિંગ (જેમ કે જનીન શોધ) વિશ્લેષણ માટે થઈ શકે છે.

બધા ઉત્પાદનો ODM/OEM માટે કસ્ટમાઇઝ કરી શકાય છે. વિગતો માટે,કૃપા કરીને કસ્ટમાઇઝ સર્વિસ (ODM/OEM) પર ક્લિક કરો

અગાઉના: TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit

આગળ: માઉસ ટીશ્યુ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કિટ

	બ્લડ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કિટ દ્વારા માનવ જીડીટીએ એન્ટીકોએગ્યુલેશનનો નમૂના તરીકે ઉપયોગ કરીને, વિવિધ જીસી સમાવિષ્ટોવાળા 4 જનીનોને વિસ્તૃત કરવામાં આવ્યા હતા. પીસીઆર રિએક્શન સિસ્ટમ 20 μl હતી, અને 1 μl લોહીનો ઉપયોગ નમૂના તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો. M: TIANGEN માર્કર II; 1: ફ્રેગમેન્ટ સાઇઝ 1090 bp, GC કન્ટેન્ટ 68.1%; 2: ફ્રેગમેન્ટ સાઇઝ 1915 bp, GC કન્ટેન્ટ 70.4%; 3: ફ્રેગમેન્ટ સાઇઝ 448 bp, GC સામગ્રી 74.8%; 4: ફ્રેગમેન્ટ સાઇઝ 1527 bp, GC કન્ટેન્ટ 61.5%. પ્રાયોગિક પરિણામો: બ્લડ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કીટ 61.5%-74.8%ની રેન્જમાં જીસી સામગ્રી સાથે ડીએનએ ટુકડાઓને અસરકારક રીતે વિસ્તૃત કરી શકે છે, જે સૂચવે છે કે તે ઉચ્ચ-જીસી ટુકડાઓને વિસ્તૃત કરવા સક્ષમ છે.
	બ્લડ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કિટ દ્વારા માનવ EDTA એન્ટીકોએગ્યુલેશનનો નમૂના તરીકે ઉપયોગ કરીને, વિવિધ લંબાઈવાળા 5 જનીનો (ActB, Prp, DN1.0, Hn2.0 અને Hn4.0) ને વિસ્તૃત કરવામાં આવ્યા હતા. પીસીઆર રિએક્શન સિસ્ટમ 20 μl હતી, અને 1 μl લોહીનો ઉપયોગ નમૂના તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો. M: TIANGEN માર્કર II; 1-3: 3 વિવિધ રક્ત નમૂનાઓ; એનટીસી: પ્રાઇમર્સ વિના નિયંત્રણ. પ્રાયોગિક પરિણામો: બ્લડ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કિટ 4 kb જેટલી લંબાઈ સાથે ટુકડાઓને વિસ્તૃત કરી શકે છે, જે સૂચવે છે કે તે લાંબા ટુકડાઓ વધારવા માટે સક્ષમ છે.
	માનવ EDTA એન્ટીકોએગ્યુલેશનનો નમૂના તરીકે ઉપયોગ કરીને, બ્લડ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કિટનો ઉપયોગ વિવિધ રક્ત નમૂનાઓની પીસીઆર તપાસ માટે કરવામાં આવ્યો હતો. પીસીઆર રિએક્શન સિસ્ટમ 20 μl હતી, અને 1 μl લોહીનો ઉપયોગ નમૂના તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો. M: TIANGEN માર્કર II; 1-9: લોહીની લોડિંગ રકમ અનુક્રમે 0.1 μl, 0.2 μl, 0.3 μl, 0.4 μl, 1 μl, 2 μl, 3 μl, 4 μl અને 5 μl છે; એનટીસી: કોઈ નમૂના વગર નિયંત્રણ પ્રાયોગિક પરિણામો: બ્લડ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કિટમાં લોહીનો મજબૂત પ્રતિકાર છે અને તે 0.1-5 μl ની લોડિંગ રેન્જ સાથે લોહીના નમૂનાઓને વધારી શકે છે.
	માનવ, ઉંદર, ચિકન અને અન્ય જાતિઓના લોહીના નમૂનાઓ વિવિધ સારવાર સાથે નમૂના તરીકે ઉપયોગમાં લેવાયા હતા. બ્લડ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કિટનો ઉપયોગ પીઆરએનપી (માનવ, 750 બીપી), એક્ટિન (ઉંદર, 200 બીપી), અને β-એક્ટિન (ચિકન, 1.0 કેબી) વધારવા માટે કરવામાં આવ્યો હતો. પીસીઆર રિએક્શન સિસ્ટમ 20 μl હતી, અને 1 μl લોહીનો ઉપયોગ નમૂના તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો. M: TIANGEN માર્કર II. પ્રાયોગિક પરિણામો: બ્લડ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કીટ નમૂનાઓની વિશાળ શ્રેણી પર લાગુ કરી શકાય છે, અને સીધી પીસીઆર તપાસ વિવિધ જાતોના લોહીના નમૂનાઓ પર વિવિધ સારવાર સાથે કરી શકાય છે.

પ્ર: એમ્પ્લીફિકેશન બેન્ડ્સ નથી

A-1 ખાંચો

■ નમૂનામાં પ્રોટીન અશુદ્ધિઓ અથવા તાક અવરોધકો વગેરે છે DNA ડીએનએ નમૂનો શુદ્ધ કરો, પ્રોટીન અશુદ્ધિઓ દૂર કરો અથવા શુદ્ધિકરણ કીટ સાથે નમૂના ડીએનએ કાો.

Template નમૂનાનું વિકૃતિકરણ પૂર્ણ નથી den યોગ્ય રીતે વિકૃતિકરણ તાપમાનમાં વધારો અને વિકૃતિકરણનો સમય લંબાવવો.

■ ાંચો અધોગતિ the નમૂનો ફરીથી તૈયાર કરો.

એ -2 પ્રાઇમર

Pri પ્રાઇમર્સની નબળી ગુણવત્તા-પ્રાઇમરનું ફરીથી સંશ્લેષણ કરો.

■ પ્રાઇમર ડિગ્રેડેશન - ઉચ્ચ સાંદ્રતાવાળા પ્રાઇમર્સને બચાવવા માટે નાના વોલ્યુમમાં વહેંચો. બહુવિધ ઠંડું અને પીગળવું અથવા લાંબા ગાળાના 4 ° C ક્રિઓપ્રિઝર્વ્ડ ટાળો.

Pri પ્રાઇમર્સની અયોગ્ય ડિઝાઇન (દા.ત. પ્રાઇમરની લંબાઇ પૂરતી નથી, પ્રાઇમર્સ વચ્ચે ડીમર રચાય છે, વગેરે)

A-3 Mg²⁺એકાગ્રતા

■ એમજી²⁺ એકાગ્રતા ખૂબ ઓછી છે - એમજીમાં સારી રીતે વધારો²⁺એકાગ્રતા: Mg ને પ્ટિમાઇઝ કરો²⁺ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા²⁺ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.

A-4 એનિલીંગ તાપમાન

Anંચું neનિલીંગ તાપમાન બાળપોથી અને નમૂનાના બંધનને અસર કરે છે. Neએનિલિંગ તાપમાન ઘટાડવું અને 2 ° C ના withાળ સાથે સ્થિતિને પ્ટિમાઇઝ કરવી.

A-5 વિસ્તરણ સમય

■ ટૂંકા વિસ્તરણ સમય extension વિસ્તરણ સમય વધારો.

પ્રશ્ન: ખોટા હકારાત્મક

ઘટના: નકારાત્મક નમૂનાઓ લક્ષ્ય ક્રમ બેન્ડ પણ દર્શાવે છે.

PCR નું A-1 દૂષણ

Target લક્ષ્ય ક્રમ અથવા એમ્પ્લીફિકેશન પ્રોડક્ટ્સનું ક્રોસ દૂષણ fully નકારાત્મક નમૂનામાં લક્ષ્ય ક્રમ ધરાવતા નમૂનાને કાળજીપૂર્વક પાઇપેટ ન કરો અથવા તેમને સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબમાંથી બહાર ફેંકી દો. હાલના ન્યુક્લિક એસિડને દૂર કરવા માટે રીએજન્ટ્સ અથવા સાધનો ઓટોક્લેવ્ડ હોવા જોઈએ, અને નકારાત્મક નિયંત્રણ પ્રયોગો દ્વારા દૂષણનું અસ્તિત્વ નક્કી કરવું જોઈએ.

■ રીએજન્ટ દૂષણ re રીએજન્ટ્સને અલગ કરો અને નીચા તાપમાને સ્ટોર કરો.

A-2 પ્રાઇમr

■ એમજી²⁺ એકાગ્રતા ખૂબ ઓછી છે - એમજીમાં સારી રીતે વધારો²⁺ એકાગ્રતા: Mg ને પ્ટિમાઇઝ કરો²⁺ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા²⁺ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.

■ અયોગ્ય પ્રાઇમર ડિઝાઇન, અને લક્ષ્ય ક્રમમાં બિન-લક્ષ્ય ક્રમ સાથે સમાનતા છે. -પ્રાઇમર્સ ફરીથી ડિઝાઇન કરો.

પ્ર: બિન-વિશિષ્ટ વિસ્તરણ

ઘટના: પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશન બેન્ડ અપેક્ષિત કદ સાથે અસંગત હોય છે, મોટા અથવા નાના, અથવા કેટલીકવાર બંને ચોક્કસ એમ્પ્લીફિકેશન બેન્ડ અને બિન-વિશિષ્ટ એમ્પ્લીફિકેશન બેન્ડ થાય છે.

એ -1 પ્રાઇમર

Pri નબળી પ્રાઇમર વિશિષ્ટતા

-ફરીથી ડિઝાઇન પ્રાઇમર.

■ પ્રાઇમર એકાગ્રતા ખૂબ વધારે છે ro યોગ્ય રીતે વિકૃતિકરણ તાપમાનમાં વધારો કરો અને વિકૃતિકરણ સમયને લંબાવો.

A-2 Mg²⁺ એકાગ્રતા

Mg ધ એમજી²⁺ એકાગ્રતા ખૂબ વધારે છે - Mg2+ એકાગ્રતાને યોગ્ય રીતે ઘટાડો: Mg ને imizeપ્ટિમાઇઝ કરો²⁺ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા²⁺ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.

એ -3 થર્મોસ્ટેબલ પોલિમરેઝ

En અતિશય એન્ઝાઇમ જથ્થો 0.5 0.5 યુના અંતરાલોમાં યોગ્ય રીતે એન્ઝાઇમની માત્રા ઘટાડવી.

A-4 એનિલીંગ તાપમાન

Ne એનિલીંગનું તાપમાન ઘણું ઓછું છે an યોગ્ય રીતે એનિલીંગ તાપમાનમાં વધારો કરો અથવા બે-તબક્કાની એનેલીંગ પદ્ધતિ અપનાવો

A-5 PCR ચક્ર

Many ઘણા બધા પીસીઆર ચક્ર - પીસીઆર ચક્રની સંખ્યા ઘટાડવી.

પ્ર: પેચી અથવા સમીયર બેન્ડ્સ

એ -1 પ્રાઇમરનબળી વિશિષ્ટતા-પ્રાઇમરને ફરીથી ડિઝાઇન કરો, તેની વિશિષ્ટતા વધારવા માટે પ્રાઇમરની સ્થિતિ અને લંબાઈ બદલો; અથવા નેસ્ટેડ પીસીઆર કરો.

A-2 ાંચો DNA

- નમૂનો શુદ્ધ નથી - નમૂનાને શુદ્ધ કરો અથવા શુદ્ધિકરણ કીટ સાથે ડીએનએ કા extractો.

A-3 Mg²⁺ એકાગ્રતા

—— એમજી²⁺ એકાગ્રતા ખૂબ વધારે છે - એમજીને યોગ્ય રીતે ઘટાડે છે²⁺ એકાગ્રતા: Mg ને પ્ટિમાઇઝ કરો²⁺ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા²⁺ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.

A-4 dNTP

- dNTP ની સાંદ્રતા ખૂબ વધારે છે - dNTP ની સાંદ્રતા યોગ્ય રીતે ઘટાડવી

A-5 એનિલીંગ તાપમાન

Low ખૂબ ઓછું એન્નીલિંગ તાપમાન an યોગ્ય રીતે એનિલીંગ તાપમાનમાં વધારો

A-6 ચક્ર

- ઘણા બધા ચક્ર - સાયકલ નંબરને પ્ટિમાઇઝ કરો

પ્રશ્ન: 50 μl PCR રિએક્શન સિસ્ટમમાં કેટલો નમૂનો DNA ઉમેરવો જોઈએ?

પ્ર: લાંબા ટુકડાઓ કેવી રીતે વધારવા?

પ્રથમ પગલું એ યોગ્ય પોલિમરેઝ પસંદ કરવાનું છે. નિયમિત તાક પોલિમરેઝ 3'-5 'એક્ઝોન્યુક્લીઝ પ્રવૃત્તિના અભાવને કારણે પ્રૂફરીડ કરી શકતું નથી, અને મેળ ન ખાવાથી ટુકડાઓની વિસ્તરણ કાર્યક્ષમતામાં ઘણો ઘટાડો થશે. તેથી, નિયમિત તાક પોલિમરેઝ 5 kb કરતા મોટા લક્ષ્ય ટુકડાઓને અસરકારક રીતે વિસ્તૃત કરી શકતું નથી. વિસ્તરણ કાર્યક્ષમતા સુધારવા અને લાંબા ટુકડા વિસ્તરણની જરૂરિયાતોને પહોંચી વળવા માટે ખાસ ફેરફાર અથવા અન્ય ઉચ્ચ વફાદારી પોલિમરેઝ સાથે તાક પોલિમરેઝ પસંદ કરવું જોઈએ. વધુમાં, લાંબા ટુકડાઓના એમ્પ્લીફિકેશન માટે પણ પ્રાઇમર ડિઝાઇન, ડિનેટરેશન ટાઇમ, એક્સટેન્શન ટાઇમ, બફર પીએચ, વગેરેને અનુરૂપ એડજસ્ટમેન્ટની જરૂર પડે છે. નમૂનાના નુકસાનને રોકવા માટે, ચક્ર દીઠ 94 ° C પર વિકૃતિકરણ સમય 30 સેકંડ અથવા ઓછો થવો જોઈએ, અને એમ્પ્લીફિકેશન પહેલાં તાપમાન 94 ° સે સુધી વધારવાનો સમય 1 મિનિટથી ઓછો હોવો જોઈએ. તદુપરાંત, વિસ્તરણ તાપમાનને લગભગ 68 ° C પર સેટ કરવું અને 1 kb/min ના દર અનુસાર વિસ્તરણ સમયની રચના લાંબા ટુકડાઓના અસરકારક વિસ્તરણને સુનિશ્ચિત કરી શકે છે.

પ્ર: પીસીઆરની એમ્પ્લીફિકેશન વફાદારી કેવી રીતે સુધારવી?

ઉચ્ચ વફાદારી સાથે વિવિધ DNA પોલિમરેજનો ઉપયોગ કરીને PCR એમ્પ્લીફિકેશનનો ભૂલ દર ઘટાડી શકાય છે. અત્યાર સુધી મળેલા તમામ તાક ડીએનએ પોલિમરેજીસ પૈકી, પીએફયુ એન્ઝાઇમ સૌથી ઓછો ભૂલ દર અને સૌથી વધુ વફાદારી ધરાવે છે (જોડાયેલ કોષ્ટક જુઓ). એન્ઝાઇમ પસંદગી ઉપરાંત, સંશોધકો પ્રતિક્રિયાની સ્થિતિને optimપ્ટિમાઇઝ કરીને પીસીઆર પરિવર્તન દરને વધુ ઘટાડી શકે છે, જેમાં બફર કમ્પોઝિશન, થર્મોસ્ટેબલ પોલિમરેઝની સાંદ્રતા અને પીસીઆર ચક્ર નંબરને પ્ટિમાઇઝ કરવાનો સમાવેશ થાય છે.

તમારો સંદેશ અહીં લખો અને અમને મોકલો

ઉત્પાદનો શ્રેણીઓ

અમને શા માટે પસંદ કરો

તેની સ્થાપનાથી, અમારી ફેક્ટરી સિદ્ધાંતને વળગીને પ્રથમ વિશ્વકક્ષાના ઉત્પાદનો વિકસિત કરી રહી છે
ગુણવત્તા પહેલા. અમારા ઉત્પાદનોએ ઉદ્યોગમાં ઉત્તમ પ્રતિષ્ઠા મેળવી છે અને નવા અને જૂના ગ્રાહકો વચ્ચે મૂલ્યવાન વિશ્વાસ.

તપાસ