■ ઉચ્ચ એમ્પ્લીફિકેશન કાર્યક્ષમતા: વિવિધ કદના ડીએનએ ટુકડાઓ (5 કેબીથી ઓછા) અને સ્ત્રોતોને અસરકારક રીતે વિસ્તૃત કરી શકાય છે.
Sensitivity ઉચ્ચ સંવેદનશીલતા: જીનોમિક નમૂનાઓમાંથી 10 pg જેટલા લક્ષ્ય ટુકડાઓ વિસ્તૃત કરી શકાય છે.
Stress ઉચ્ચ તાણ પ્રતિકાર: રફ-એક્સ્ટ્રેક્ટેડ ટેમ્પલેટ/બેક્ટેરિયલ કલ્ચર જેવી ઉચ્ચ અશુદ્ધિ સામગ્રી ધરાવતા નમૂનાઓ માટે, લક્ષ્ય ટુકડાને સરળતાથી વિસ્તૃત કરી શકાય છે. વારંવાર ઠંડું અને પીગળવાથી પોલિમરેઝ પ્રવૃત્તિને અસર થશે નહીં.
Applications અરજીઓ માટે અનુકૂળ: પ્રતિક્રિયા પ્રણાલી સરળતાથી અને ઝડપથી તૈયાર કરવામાં આવી હતી. એમ્પ્લીફાઇડ ફ્રેગમેન્ટમાં 3-એન્ડ dA- ઓવરહેંગ છે, જે TA ક્લોનિંગ માટે અનુકૂળ છે.
પ્રકાર: તાક ડીએનએ પોલિમરેઝ
નમૂના: શુદ્ધ/રફ-એક્સટ્રેક્ટેડ નમૂનો/બેક્ટેરિયલ સંસ્કૃતિ
Temાંચો: > 10 પૃષ્ઠ
ટુકડાનું કદ: <5 કેબી
અરજીઓ: ડીએનએ ટુકડાઓનું પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશન, ડીએનએ લેબલિંગ, પ્રાઇમર એક્સ્ટેંશન, ક્રમ નિર્ધારણ, મોટા પાયે જનીન શોધ, અર્ધ-માત્રાત્મક પીસીઆર પ્રયોગો, ટ્રેસ ડીએનએની શોધ વગેરે.
બધા ઉત્પાદનો ODM/OEM માટે કસ્ટમાઇઝ કરી શકાય છે. વિગતો માટે,કૃપા કરીને કસ્ટમાઇઝ સર્વિસ (ODM/OEM) પર ક્લિક કરો
આકૃતિ 1. રીએજન્ટ્સના તણાવ પ્રતિકારને શોધવા માટે અનુક્રમે TIANGEN Taq MasterMix II અને સપ્લાયર TR તરફથી સામાન્ય Taq મિક્સ દ્વારા અલગ અલગ સ્રોતોના નમૂનાઓ વિસ્તૃત કરવામાં આવ્યા હતા. પરિણામો દર્શાવે છે કે ટિએનજેન ઉત્પાદનો ક્રૂડ જીનોમિક ટેમ્પલેટ્સ અને બેક્ટેરિયલ સંસ્કૃતિના લક્ષ્ય ટુકડાઓને વિસ્તૃત કરી શકે છે, અને તણાવ પ્રતિકાર સપ્લાયર ટીઆર કરતા વધુ સારો છે. A: TIANGEN TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit દ્વારા કાedવામાં આવેલ ક્રૂડ જીનોમિક ટેમ્પલેટ. પીઆરપી/ડીએન: ક્રૂડ નિષ્કર્ષણ અને માનવ રક્ત નમૂનાઓની તપાસ. ચોખા: ચોખાના નમૂનાઓની ક્રૂડ નિષ્કર્ષણ અને તપાસ. બી: કોલોની પીસીઆર. પીસીઆર ટુકડો 700 બીપી છે. M: TIANGEN માર્કર III |
|
વિવિધ સ્રોતોમાંથી અને વિવિધ લંબાઈવાળા નમૂનાઓ માટે સારી સાર્વત્રિકતા આકૃતિ 2. વિવિધ સ્રોતો અને લંબાઈના ટુકડાઓ TIANGEN નો ઉપયોગ કરીને વિસ્તૃત કરવામાં આવ્યા હતા તાક MasterMix II (A) અને સામાન્ય તાક અનુક્રમે સપ્લાયર TK (B), સપ્લાયર TR (C), સપ્લાયર V (D) અને સપ્લાયર G (E) નું મિશ્રણ. પરિણામો દર્શાવે છે કે TIANGEN ઉત્પાદનોનું વ્યાપક પ્રદર્શન એમ્પ્લીફિકેશન ક્ષમતા, વિશિષ્ટતા અને સાર્વત્રિકતાની દ્રષ્ટિએ શ્રેષ્ઠ છે. M: TIANGEN માર્કર III1: સોયાબીન જીનોમિક DNA નમૂનો (120 bp); 2-3: ચોખા જીનોમિક ડીએનએ નમૂનો (694 bp, 2258 bp); 4: કપાસ જીનોમિક ડીએનએ નમૂનો (200 bp); 5: એસ્ચેરીચીયા કોલી જીનોમિક ડીએનએ નમૂનો (2298 bp); 6-7: માઉસ જીનોમ ડીએનએ નમૂનો (1 કેબી, 2 કેબી); 8-10: ઉંદર જીનોમિક DNA નમૂનો (1 kb, 2 kb, 2080 bp); 11-18: માનવ જીનોમ ડીએનએ નમૂનો (300 bp, 448 bp (GC%: 74.8%), 1100 bp, 750 bp, 1000 bp, 1090 bp (GC%: 70.4%), 2 kb, 4 kb) |
|
ઉચ્ચ સંવેદનશીલતા આકૃતિ 3. ઉંદરની વિવિધ સાંદ્રતા અને માનવ ડીએનએ ટુકડાઓ TIANGEN નો ઉપયોગ કરીને વિસ્તૃત કરવામાં આવ્યા હતા તાક MasterMix II (A), સામાન્ય તાક એમ્પ્લીફિકેશન સંવેદનશીલતા શોધવા માટે અનુક્રમે સપ્લાયર V (B) અને સપ્લાયર TK (C) નું મિશ્રણ. પરિણામો બતાવે છે કે TIANGEN ઉત્પાદન 0.01 એનજી જેટલું ઓછું જીનોમ નમૂનામાંથી લક્ષ્ય ટુકડાને વિસ્તૃત કરી શકે છે, અને તેની સંવેદનશીલતા સપ્લાયર V અને TK.M: TIANGEN માર્કર III, N: NTCT ટેમ્પલેટ ઇનપુટ 1-8 કરતાં વધુ સારી છે. : 200 એનજી, 100 એનજી, 50 એનજી, 20 એનજી, 10 એનજી, 1 એનજી, 0.1 એનજી, 0.01 એનજી. |
A-1 ખાંચો
■ નમૂનામાં પ્રોટીન અશુદ્ધિઓ અથવા તાક અવરોધકો વગેરે છે DNA ડીએનએ નમૂનો શુદ્ધ કરો, પ્રોટીન અશુદ્ધિઓ દૂર કરો અથવા શુદ્ધિકરણ કીટ સાથે નમૂના ડીએનએ કાો.
Template નમૂનાનું વિકૃતિકરણ પૂર્ણ નથી den યોગ્ય રીતે વિકૃતિકરણ તાપમાનમાં વધારો અને વિકૃતિકરણનો સમય લંબાવવો.
■ ાંચો અધોગતિ the નમૂનો ફરીથી તૈયાર કરો.
એ -2 પ્રાઇમર
Pri પ્રાઇમર્સની નબળી ગુણવત્તા-પ્રાઇમરનું ફરીથી સંશ્લેષણ કરો.
■ પ્રાઇમર ડિગ્રેડેશન - ઉચ્ચ સાંદ્રતાવાળા પ્રાઇમર્સને બચાવવા માટે નાના વોલ્યુમમાં વહેંચો. બહુવિધ ઠંડું અને પીગળવું અથવા લાંબા ગાળાના 4 ° C ક્રિઓપ્રિઝર્વ્ડ ટાળો.
Pri પ્રાઇમર્સની અયોગ્ય ડિઝાઇન (દા.ત. પ્રાઇમરની લંબાઇ પૂરતી નથી, પ્રાઇમર્સ વચ્ચે ડીમર રચાય છે, વગેરે)
A-3 Mg2+એકાગ્રતા
■ એમજી2+ એકાગ્રતા ખૂબ ઓછી છે - એમજીમાં સારી રીતે વધારો2+ એકાગ્રતા: Mg ને પ્ટિમાઇઝ કરો2+ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા2+ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.
A-4 એનિલીંગ તાપમાન
Anંચું neનિલીંગ તાપમાન બાળપોથી અને નમૂનાના બંધનને અસર કરે છે. Neએનિલિંગ તાપમાન ઘટાડવું અને 2 ° C ના withાળ સાથે સ્થિતિને પ્ટિમાઇઝ કરવી.
A-5 વિસ્તરણ સમય
■ ટૂંકા વિસ્તરણ સમય extension વિસ્તરણ સમય વધારો.
ઘટના: નકારાત્મક નમૂનાઓ લક્ષ્ય ક્રમ બેન્ડ પણ દર્શાવે છે.
PCR નું A-1 દૂષણ
Target લક્ષ્ય ક્રમ અથવા એમ્પ્લીફિકેશન પ્રોડક્ટ્સનું ક્રોસ દૂષણ fully નકારાત્મક નમૂનામાં લક્ષ્ય ક્રમ ધરાવતા નમૂનાને કાળજીપૂર્વક પાઇપેટ ન કરો અથવા તેમને સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબમાંથી બહાર ફેંકી દો. હાલના ન્યુક્લિક એસિડને દૂર કરવા માટે રીએજન્ટ્સ અથવા સાધનો ઓટોક્લેવ્ડ હોવા જોઈએ, અને નકારાત્મક નિયંત્રણ પ્રયોગો દ્વારા દૂષણનું અસ્તિત્વ નક્કી કરવું જોઈએ.
■ રીએજન્ટ દૂષણ re રીએજન્ટ્સને અલગ કરો અને નીચા તાપમાને સ્ટોર કરો.
A-2 પ્રાઇમr
■ એમજી2+ એકાગ્રતા ખૂબ ઓછી છે - એમજીમાં સારી રીતે વધારો2+ એકાગ્રતા: Mg ને પ્ટિમાઇઝ કરો2+ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા2+ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.
■ અયોગ્ય પ્રાઇમર ડિઝાઇન, અને લક્ષ્ય ક્રમમાં બિન-લક્ષ્ય ક્રમ સાથે સમાનતા છે. -પ્રાઇમર્સ ફરીથી ડિઝાઇન કરો.
ઘટના: પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશન બેન્ડ અપેક્ષિત કદ સાથે અસંગત હોય છે, મોટા અથવા નાના, અથવા કેટલીકવાર બંને ચોક્કસ એમ્પ્લીફિકેશન બેન્ડ અને બિન-વિશિષ્ટ એમ્પ્લીફિકેશન બેન્ડ થાય છે.
એ -1 પ્રાઇમર
Pri નબળી પ્રાઇમર વિશિષ્ટતા
-ફરીથી ડિઝાઇન પ્રાઇમર.
■ પ્રાઇમર એકાગ્રતા ખૂબ વધારે છે ro યોગ્ય રીતે વિકૃતિકરણ તાપમાનમાં વધારો કરો અને વિકૃતિકરણ સમયને લંબાવો.
A-2 Mg2+ એકાગ્રતા
Mg ધ એમજી2+ એકાગ્રતા ખૂબ વધારે છે - Mg2+ એકાગ્રતાને યોગ્ય રીતે ઘટાડો: Mg ને imizeપ્ટિમાઇઝ કરો2+ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા2+ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.
એ -3 થર્મોસ્ટેબલ પોલિમરેઝ
En અતિશય એન્ઝાઇમ જથ્થો 0.5 0.5 યુના અંતરાલોમાં યોગ્ય રીતે એન્ઝાઇમની માત્રા ઘટાડવી.
A-4 એનિલીંગ તાપમાન
Ne એનિલીંગનું તાપમાન ઘણું ઓછું છે an યોગ્ય રીતે એનિલીંગ તાપમાનમાં વધારો કરો અથવા બે-તબક્કાની એનેલીંગ પદ્ધતિ અપનાવો
A-5 PCR ચક્ર
Many ઘણા બધા પીસીઆર ચક્ર - પીસીઆર ચક્રની સંખ્યા ઘટાડવી.
એ -1 પ્રાઇમરનબળી વિશિષ્ટતા-પ્રાઇમરને ફરીથી ડિઝાઇન કરો, તેની વિશિષ્ટતા વધારવા માટે પ્રાઇમરની સ્થિતિ અને લંબાઈ બદલો; અથવા નેસ્ટેડ પીસીઆર કરો.
A-2 ાંચો DNA
- નમૂનો શુદ્ધ નથી - નમૂનાને શુદ્ધ કરો અથવા શુદ્ધિકરણ કીટ સાથે ડીએનએ કા extractો.
A-3 Mg2+ એકાગ્રતા
—— એમજી2+ એકાગ્રતા ખૂબ વધારે છે - એમજીને યોગ્ય રીતે ઘટાડે છે2+ એકાગ્રતા: Mg ને પ્ટિમાઇઝ કરો2+ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા2+ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.
A-4 dNTP
- dNTP ની સાંદ્રતા ખૂબ વધારે છે - dNTP ની સાંદ્રતા યોગ્ય રીતે ઘટાડવી
A-5 એનિલીંગ તાપમાન
Low ખૂબ ઓછું એન્નીલિંગ તાપમાન an યોગ્ય રીતે એનિલીંગ તાપમાનમાં વધારો
A-6 ચક્ર
- ઘણા બધા ચક્ર - સાયકલ નંબરને પ્ટિમાઇઝ કરો
પ્રથમ પગલું એ યોગ્ય પોલિમરેઝ પસંદ કરવાનું છે. નિયમિત તાક પોલિમરેઝ 3'-5 'એક્ઝોન્યુક્લીઝ પ્રવૃત્તિના અભાવને કારણે પ્રૂફરીડ કરી શકતું નથી, અને મેળ ન ખાવાથી ટુકડાઓની વિસ્તરણ કાર્યક્ષમતામાં ઘણો ઘટાડો થશે. તેથી, નિયમિત તાક પોલિમરેઝ 5 kb કરતા મોટા લક્ષ્ય ટુકડાઓને અસરકારક રીતે વિસ્તૃત કરી શકતું નથી. વિસ્તરણ કાર્યક્ષમતા સુધારવા અને લાંબા ટુકડા વિસ્તરણની જરૂરિયાતોને પહોંચી વળવા માટે ખાસ ફેરફાર અથવા અન્ય ઉચ્ચ વફાદારી પોલિમરેઝ સાથે તાક પોલિમરેઝ પસંદ કરવું જોઈએ. વધુમાં, લાંબા ટુકડાઓના એમ્પ્લીફિકેશન માટે પણ પ્રાઇમર ડિઝાઇન, ડિનેટરેશન ટાઇમ, એક્સટેન્શન ટાઇમ, બફર પીએચ, વગેરેને અનુરૂપ એડજસ્ટમેન્ટની જરૂર પડે છે. નમૂનાના નુકસાનને રોકવા માટે, ચક્ર દીઠ 94 ° C પર વિકૃતિકરણ સમય 30 સેકંડ અથવા ઓછો થવો જોઈએ, અને એમ્પ્લીફિકેશન પહેલાં તાપમાન 94 ° સે સુધી વધારવાનો સમય 1 મિનિટથી ઓછો હોવો જોઈએ. તદુપરાંત, વિસ્તરણ તાપમાનને લગભગ 68 ° C પર સેટ કરવું અને 1 kb/min ના દર અનુસાર વિસ્તરણ સમયની રચના લાંબા ટુકડાઓના અસરકારક વિસ્તરણને સુનિશ્ચિત કરી શકે છે.
ઉચ્ચ વફાદારી સાથે વિવિધ DNA પોલિમરેજનો ઉપયોગ કરીને PCR એમ્પ્લીફિકેશનનો ભૂલ દર ઘટાડી શકાય છે. અત્યાર સુધી મળેલા તમામ તાક ડીએનએ પોલિમરેજીસ પૈકી, પીએફયુ એન્ઝાઇમ સૌથી ઓછો ભૂલ દર અને સૌથી વધુ વફાદારી ધરાવે છે (જોડાયેલ કોષ્ટક જુઓ). એન્ઝાઇમ પસંદગી ઉપરાંત, સંશોધકો પ્રતિક્રિયાની સ્થિતિને optimપ્ટિમાઇઝ કરીને પીસીઆર પરિવર્તન દરને વધુ ઘટાડી શકે છે, જેમાં બફર કમ્પોઝિશન, થર્મોસ્ટેબલ પોલિમરેઝની સાંદ્રતા અને પીસીઆર ચક્ર નંબરને પ્ટિમાઇઝ કરવાનો સમાવેશ થાય છે.
તેની સ્થાપનાથી, અમારી ફેક્ટરી સિદ્ધાંતને વળગીને પ્રથમ વિશ્વકક્ષાના ઉત્પાદનો વિકસિત કરી રહી છે
ગુણવત્તા પહેલા. અમારા ઉત્પાદનોએ ઉદ્યોગમાં ઉત્તમ પ્રતિષ્ઠા મેળવી છે અને નવા અને જૂના ગ્રાહકો વચ્ચે મૂલ્યવાન વિશ્વાસ.