RNAclean Kit

એ -1 સેલ લિસીસ અથવા હોમોજેનાઇઝેશન પૂરતું નથી

---- નમૂનાનો વપરાશ ઘટાડવો, લિસીસ બફરની માત્રામાં વધારો, એકરૂપતા અને લિસીસનો સમય વધારવો.

A-2 નમૂનાની રકમ ખૂબ મોટી છે

---- વપરાયેલ નમૂનાની માત્રામાં ઘટાડો અથવા લિસીસ બફરની માત્રામાં વધારો.

A-1 અપૂરતી સેલ લિસિસ અથવા હોમોજેનાઇઝેશન

---- નમૂનાનો વપરાશ ઘટાડવો, લિસીસ બફરની માત્રામાં વધારો, એકરૂપતા અને લિસીસનો સમય વધારવો.

A-2 નમૂનાની રકમ ખૂબ મોટી છે

---- કૃપા કરીને મહત્તમ પ્રક્રિયા ક્ષમતા નો સંદર્ભ લો.

એ -3 આરએનએ સ્તંભમાંથી સંપૂર્ણપણે અલગ નથી

---- RNase- મુક્ત પાણી ઉમેર્યા પછી, તેને સેન્ટ્રીફ્યુગ કરતા પહેલા થોડીવાર માટે છોડી દો.

E-4 ઇલેનોલમાં ઇથેનોલ

---- કોગળા કર્યા પછી, ફરીથી સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો અને શક્ય તેટલું ધોવાનું બફર દૂર કરો.

A-5 સેલ કલ્ચર માધ્યમ સંપૂર્ણપણે દૂર નથી

---- કોષો એકત્રિત કરતી વખતે, કૃપા કરીને શક્ય તેટલું સંસ્કૃતિ માધ્યમ દૂર કરવાની ખાતરી કરો.

A-6 RNAstore માં સંગ્રહિત કોષો અસરકારક રીતે સેન્ટ્રીફ્યુજ થતા નથી

---- RNAstore ઘનતા સરેરાશ કોષ સંસ્કૃતિ માધ્યમ કરતા વધારે છે; તેથી કેન્દ્રત્યાગી બળ વધારવું જોઈએ. 3000x g પર સેન્ટ્રીફ્યુજ કરવાનું સૂચન કરવામાં આવે છે.

નમૂનામાં A-7 ની ઓછી RNA સામગ્રી અને વિપુલતા

---- ઓછી ઉપજ નમૂનાને કારણે છે કે કેમ તે નક્કી કરવા માટે હકારાત્મક નમૂનાનો ઉપયોગ કરો.

A-1 સામગ્રી તાજી નથી

---- તાજા પેશીઓ તરત જ પ્રવાહી નાઇટ્રોજનમાં સંગ્રહિત થવી જોઈએ અથવા તરત જ આરએનએસ્ટોર રીએજન્ટમાં મૂકવી જોઈએ જેથી નિષ્કર્ષણ અસર સુનિશ્ચિત થાય.

A-2 નમૂનાની રકમ ખૂબ મોટી છે

---- નમૂનાની રકમ ઘટાડવી.

A-3 RNase દૂષણn

---- જોકે કીટમાં આપવામાં આવેલ બફર RNase ધરાવતું નથી, નિષ્કર્ષણ પ્રક્રિયા દરમિયાન RNase ને દૂષિત કરવું સહેલું છે અને તેને કાળજીપૂર્વક સંભાળવું જોઈએ.

એ -4 ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ પ્રદૂષણ

---- ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ બફર બદલો અને ખાતરી કરો કે ઉપભોક્તા અને લોડિંગ બફર RNase દૂષણથી મુક્ત છે.

A-5 ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ માટે ખૂબ લોડિંગ

---- નમૂના લોડિંગની માત્રામાં ઘટાડો, દરેક કૂવાનું લોડિંગ 2 μg કરતા વધારે ન હોવું જોઈએ.

A-1 નમૂનાની રકમ ખૂબ મોટી છે

---- નમૂનાની રકમ ઘટાડવી.

A-2 કેટલાક નમૂનાઓમાં ઉચ્ચ DNA સામગ્રી હોય છે અને DNase સાથે સારવાર કરી શકાય છે.

---- પ્રાપ્ત RNA સોલ્યુશનમાં RNase- ફ્રી DNase ટ્રીટમેન્ટ કરો, અને RNA નો ઉપયોગ સીધા સારવાર પછીના પ્રયોગો માટે થઈ શકે છે, અથવા RNA શુદ્ધિકરણ કીટ દ્વારા વધુ શુદ્ધ કરી શકાય છે.

કાચનાં વાસણો માટે, 150 ° C પર 4 કલાક માટે શેકવામાં આવે છે. પ્લાસ્ટિકના કન્ટેનર માટે, 0.5 M NaOH માં 10 મિનિટ માટે ડૂબી જાય છે, પછી RNase- મુક્ત પાણીથી સારી રીતે ધોઈ નાખવામાં આવે છે અને પછી RNase ને સંપૂર્ણપણે દૂર કરવા માટે વંધ્યીકૃત કરવામાં આવે છે. પ્રયોગમાં ઉપયોગમાં લેવાતા રીએજન્ટ્સ અથવા સોલ્યુશન્સ, ખાસ કરીને પાણી, RNase થી મુક્ત હોવા જોઈએ. બધી રીએજન્ટ તૈયારીઓ માટે RNase- મુક્ત પાણીનો ઉપયોગ કરો (સ્વચ્છ કાચની બોટલમાં પાણી ઉમેરો, 0.1% (V/V) ની અંતિમ સાંદ્રતામાં DEPC ઉમેરો, રાતોરાત હલાવો અને ઓટોક્લેવ કરો).