માઉસ ટીશ્યુ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કિટ

નિષ્કર્ષણ વિના પ્રાણીના પેશીઓના નમૂનાઓમાંથી સીધા લક્ષ્ય જનીનનું ઝડપી વિસ્તરણ.

માઉસ ટીશ્યુ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કિટ એક અનન્ય પેકેજિંગ ડિઝાઇન અપનાવે છે જેમાં ઝડપી જીનોમિક ડીએનએ તૈયારી અને પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશન માટેના તમામ રીએજન્ટ્સનો સમાવેશ થાય છે. તે માઉસ પેશીઓ (પૂંછડી, કાન અને ટો) માંથી એક-પગલા જીનોમ ડીએનએ શુદ્ધિકરણ અને ત્યારબાદના પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશન અને તપાસ માટે લાગુ પડે છે. સમગ્ર પ્રક્રિયામાં એકરૂપતા, સ્મેશિંગ, રાતોરાત પાચન, કાર્બનિક દ્રાવક નિષ્કર્ષણ, ઇથેનોલ વરસાદ અથવા સ્તંભ શુદ્ધિકરણ પગલાં શામેલ નથી. સરળ અને ઝડપી કામગીરીથી સ્થિર પરિણામો મેળવી શકાય છે.

આ કિટ દ્વારા પૂરા પાડવામાં આવેલ 2 × ડીર પીસીઆર માસ્ટરમિક્સ એક અત્યંત સુસંગત પીસીઆર રીએજન્ટ છે જે પ્રોટીન જેવી અશુદ્ધિઓ દૂર કર્યા વગર ડીએનએને અસરકારક અને ખાસ કરીને વિસ્તૃત કરી શકે છે. આ રીએજન્ટમાં એન્ટિબોડી સુધારેલ હોટ-સ્ટાર્ટ છેતાક DNA પોલિમરેઝ, dNTPs, MgCl₂, બફર્સ, તેમજ PCR પ્રતિક્રિયા માટે ઉન્નતકર્તા, optimપ્ટિમાઇઝર અને સ્ટેબિલાઇઝર. પીસીઆર પ્રતિક્રિયા ફક્ત આશરે કા extractેલા નમૂના અને ચોક્કસ પ્રાઇમર્સમાં ઉમેરીને કરી શકાય છે. આખી પ્રક્રિયા ઝડપી, સરળ, સંવેદનશીલ, વિશિષ્ટ અને સ્થિર છે, જે ખાસ કરીને હાઇ-થ્રુપુટ સ્ક્રીનીંગ માટે યોગ્ય છે. 2 × ડીર પીસીઆર માસ્ટરમિક્સમાં પ્રિમીક્સ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ ડાય હોય છે, જેથી પ્રતિક્રિયા પછી પીસીઆર પ્રોડક્ટ્સને સીધા ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ તપાસ માટે મોકલી શકાય. PCR પ્રોડક્ટના 3 'ઓવરને A-tailing છે, જેનો ઉપયોગ TA ક્લોનિંગ માટે થઈ શકે છે.

બિલાડી. ના	પેકિંગ માપ
4992531	20 µl × 50 rxn
4992532	20 µl × 200 rxn

અમને ઇમેઇલ મોકલો

ઉત્પાદન વિગત

કાર્યપ્રવાહ

પ્રાયોગિક ઉદાહરણ

પ્રશ્નો

ઉત્પાદન ટ Tagsગ્સ

વિશેષતા

■ સરળ અને ઝડપી: જિનોમિક DNA 60 મિનિટમાં પ્રવાહી નાઇટ્રોજન ગ્રાઇન્ડીંગ અને ઓર્ગેનિક દ્રાવક નિષ્કર્ષણ વગર માઉસ પેશીઓમાંથી ઝડપથી બહાર કાી શકાય છે.
Application વ્યાપક એપ્લિકેશન: તે ઉંદરની પૂંછડી, કાન, અંગૂઠા અને અન્ય પેશીઓમાંથી જીનોમિક ડીએનએના એક-પગલાના નિષ્કર્ષણ માટે યોગ્ય છે.
■ ઉચ્ચ વિશિષ્ટતા: આ પ્રોડક્ટમાં ઉપયોગમાં લેવાતી તાક પોલિમરેઝ એ એન્ટિબોડી સુધારેલ હોટ-સ્ટાર્ટ એન્ઝાઇમ છે, જેમાં ઉચ્ચ નમૂના અને પ્રાઇમર એફિનેશન અને એમ્પ્લીફિકેશન વિશિષ્ટતા છે, જે ખાસ કરીને જીનોટાઇપિંગ અને ટ્રાન્સજેનિક ઓળખ માટે યોગ્ય છે.
■ જનીન શોધ: ઉત્પાદન વિશ્વસનીય પરિણામો સાથે કામ કરવા માટે સરળ છે, અને તે ખાસ કરીને ઉચ્ચ-થ્રુપુટ વિશ્લેષણ અને માઉસ પેશીઓની શોધ માટે યોગ્ય છે.

બધા ઉત્પાદનો ODM/OEM માટે કસ્ટમાઇઝ કરી શકાય છે. વિગતો માટે,કૃપા કરીને કસ્ટમાઇઝ સર્વિસ (ODM/OEM) પર ક્લિક કરો

અગાઉના: બ્લડ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કિટ

આગળ: ઝડપી સાઇટ-નિર્દેશિત મ્યુટેજેનેસિસ કિટ

Experimental Example

માઉસ ટિશ્યૂ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કિટ અને સપ્લાયર A તરફથી સંબંધિત ઉત્પાદનનો ઉપયોગ કરીને અનુક્રમે 1000 બીપી, 2000 બીપી અને 3000 બીપીના ટુકડાને માઉસ ટેઇલ, માઉસ ઇયર અને ઉંદર પૂંછડીમાંથી વધારવા. પરિણામ દર્શાવે છે કે માઉસ ટીશ્યુ ડાયરેક્ટ પીસીઆર કિટમાં વધુ સારી વિશિષ્ટતા અને સફળતા દર છે.

પ્ર: એમ્પ્લીફિકેશન બેન્ડ્સ નથી

A-1 ખાંચો

■ નમૂનામાં પ્રોટીન અશુદ્ધિઓ અથવા તાક અવરોધકો વગેરે છે DNA ડીએનએ નમૂનો શુદ્ધ કરો, પ્રોટીન અશુદ્ધિઓ દૂર કરો અથવા શુદ્ધિકરણ કીટ સાથે નમૂના ડીએનએ કાો.

Template નમૂનાનું વિકૃતિકરણ પૂર્ણ નથી den યોગ્ય રીતે વિકૃતિકરણ તાપમાનમાં વધારો અને વિકૃતિકરણનો સમય લંબાવવો.

■ ાંચો અધોગતિ the નમૂનો ફરીથી તૈયાર કરો.

એ -2 પ્રાઇમર

Pri પ્રાઇમર્સની નબળી ગુણવત્તા-પ્રાઇમરનું ફરીથી સંશ્લેષણ કરો.

■ પ્રાઇમર ડિગ્રેડેશન - ઉચ્ચ સાંદ્રતાવાળા પ્રાઇમર્સને બચાવવા માટે નાના વોલ્યુમમાં વહેંચો. બહુવિધ ઠંડું અને પીગળવું અથવા લાંબા ગાળાના 4 ° C ક્રિઓપ્રિઝર્વ્ડ ટાળો.

Pri પ્રાઇમર્સની અયોગ્ય ડિઝાઇન (દા.ત. પ્રાઇમરની લંબાઇ પૂરતી નથી, પ્રાઇમર્સ વચ્ચે ડીમર રચાય છે, વગેરે)

A-3 Mg²⁺એકાગ્રતા

■ એમજી²⁺ એકાગ્રતા ખૂબ ઓછી છે - એમજીમાં સારી રીતે વધારો²⁺એકાગ્રતા: Mg ને પ્ટિમાઇઝ કરો²⁺ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા²⁺ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.

A-4 એનિલીંગ તાપમાન

Anંચું neનિલીંગ તાપમાન બાળપોથી અને નમૂનાના બંધનને અસર કરે છે. Neએનિલિંગ તાપમાન ઘટાડવું અને 2 ° C ના withાળ સાથે સ્થિતિને પ્ટિમાઇઝ કરવી.

A-5 વિસ્તરણ સમય

■ ટૂંકા વિસ્તરણ સમય extension વિસ્તરણ સમય વધારો.

પ્રશ્ન: ખોટા હકારાત્મક

ઘટના: નકારાત્મક નમૂનાઓ લક્ષ્ય ક્રમ બેન્ડ પણ દર્શાવે છે.

PCR નું A-1 દૂષણ

Target લક્ષ્ય ક્રમ અથવા એમ્પ્લીફિકેશન પ્રોડક્ટ્સનું ક્રોસ દૂષણ fully નકારાત્મક નમૂનામાં લક્ષ્ય ક્રમ ધરાવતા નમૂનાને કાળજીપૂર્વક પાઇપેટ ન કરો અથવા તેમને સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબમાંથી બહાર ફેંકી દો. હાલના ન્યુક્લિક એસિડને દૂર કરવા માટે રીએજન્ટ્સ અથવા સાધનો ઓટોક્લેવ્ડ હોવા જોઈએ, અને નકારાત્મક નિયંત્રણ પ્રયોગો દ્વારા દૂષણનું અસ્તિત્વ નક્કી કરવું જોઈએ.

■ રીએજન્ટ દૂષણ re રીએજન્ટ્સને અલગ કરો અને નીચા તાપમાને સ્ટોર કરો.

A-2 પ્રાઇમr

■ એમજી²⁺ એકાગ્રતા ખૂબ ઓછી છે - એમજીમાં સારી રીતે વધારો²⁺ એકાગ્રતા: Mg ને પ્ટિમાઇઝ કરો²⁺ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા²⁺ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.

■ અયોગ્ય પ્રાઇમર ડિઝાઇન, અને લક્ષ્ય ક્રમમાં બિન-લક્ષ્ય ક્રમ સાથે સમાનતા છે. -પ્રાઇમર્સ ફરીથી ડિઝાઇન કરો.

પ્ર: બિન-વિશિષ્ટ વિસ્તરણ

ઘટના: પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશન બેન્ડ અપેક્ષિત કદ સાથે અસંગત હોય છે, મોટા અથવા નાના, અથવા કેટલીકવાર બંને ચોક્કસ એમ્પ્લીફિકેશન બેન્ડ અને બિન-વિશિષ્ટ એમ્પ્લીફિકેશન બેન્ડ થાય છે.

એ -1 પ્રાઇમર

Pri નબળી પ્રાઇમર વિશિષ્ટતા

-ફરીથી ડિઝાઇન પ્રાઇમર.

■ પ્રાઇમર એકાગ્રતા ખૂબ વધારે છે ro યોગ્ય રીતે વિકૃતિકરણ તાપમાનમાં વધારો કરો અને વિકૃતિકરણ સમયને લંબાવો.

A-2 Mg²⁺ એકાગ્રતા

Mg ધ એમજી²⁺ એકાગ્રતા ખૂબ વધારે છે - Mg2+ એકાગ્રતાને યોગ્ય રીતે ઘટાડો: Mg ને imizeપ્ટિમાઇઝ કરો²⁺ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા²⁺ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.

એ -3 થર્મોસ્ટેબલ પોલિમરેઝ

En અતિશય એન્ઝાઇમ જથ્થો 0.5 0.5 યુના અંતરાલોમાં યોગ્ય રીતે એન્ઝાઇમની માત્રા ઘટાડવી.

A-4 એનિલીંગ તાપમાન

Ne એનિલીંગનું તાપમાન ઘણું ઓછું છે an યોગ્ય રીતે એનિલીંગ તાપમાનમાં વધારો કરો અથવા બે-તબક્કાની એનેલીંગ પદ્ધતિ અપનાવો

A-5 PCR ચક્ર

Many ઘણા બધા પીસીઆર ચક્ર - પીસીઆર ચક્રની સંખ્યા ઘટાડવી.

પ્ર: પેચી અથવા સમીયર બેન્ડ્સ

એ -1 પ્રાઇમરનબળી વિશિષ્ટતા-પ્રાઇમરને ફરીથી ડિઝાઇન કરો, તેની વિશિષ્ટતા વધારવા માટે પ્રાઇમરની સ્થિતિ અને લંબાઈ બદલો; અથવા નેસ્ટેડ પીસીઆર કરો.

A-2 ાંચો DNA

- નમૂનો શુદ્ધ નથી - નમૂનાને શુદ્ધ કરો અથવા શુદ્ધિકરણ કીટ સાથે ડીએનએ કા extractો.

A-3 Mg²⁺ એકાગ્રતા

—— એમજી²⁺ એકાગ્રતા ખૂબ વધારે છે - એમજીને યોગ્ય રીતે ઘટાડે છે²⁺ એકાગ્રતા: Mg ને પ્ટિમાઇઝ કરો²⁺ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા²⁺ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.

A-4 dNTP

- dNTP ની સાંદ્રતા ખૂબ વધારે છે - dNTP ની સાંદ્રતા યોગ્ય રીતે ઘટાડવી

A-5 એનિલીંગ તાપમાન

Low ખૂબ ઓછું એન્નીલિંગ તાપમાન an યોગ્ય રીતે એનિલીંગ તાપમાનમાં વધારો

A-6 ચક્ર

- ઘણા બધા ચક્ર - સાયકલ નંબરને પ્ટિમાઇઝ કરો

પ્રશ્ન: 50 μl PCR રિએક્શન સિસ્ટમમાં કેટલો નમૂનો DNA ઉમેરવો જોઈએ?

પ્ર: લાંબા ટુકડાઓ કેવી રીતે વધારવા?

પ્રથમ પગલું એ યોગ્ય પોલિમરેઝ પસંદ કરવાનું છે. નિયમિત તાક પોલિમરેઝ 3'-5 'એક્ઝોન્યુક્લીઝ પ્રવૃત્તિના અભાવને કારણે પ્રૂફરીડ કરી શકતું નથી, અને મેળ ન ખાવાથી ટુકડાઓની વિસ્તરણ કાર્યક્ષમતામાં ઘણો ઘટાડો થશે. તેથી, નિયમિત તાક પોલિમરેઝ 5 kb કરતા મોટા લક્ષ્ય ટુકડાઓને અસરકારક રીતે વિસ્તૃત કરી શકતું નથી. વિસ્તરણ કાર્યક્ષમતા સુધારવા અને લાંબા ટુકડા વિસ્તરણની જરૂરિયાતોને પહોંચી વળવા માટે ખાસ ફેરફાર અથવા અન્ય ઉચ્ચ વફાદારી પોલિમરેઝ સાથે તાક પોલિમરેઝ પસંદ કરવું જોઈએ. વધુમાં, લાંબા ટુકડાઓના એમ્પ્લીફિકેશન માટે પણ પ્રાઇમર ડિઝાઇન, ડિનેટરેશન ટાઇમ, એક્સટેન્શન ટાઇમ, બફર પીએચ, વગેરેને અનુરૂપ એડજસ્ટમેન્ટની જરૂર પડે છે. નમૂનાના નુકસાનને રોકવા માટે, ચક્ર દીઠ 94 ° C પર વિકૃતિકરણ સમય 30 સેકંડ અથવા ઓછો થવો જોઈએ, અને એમ્પ્લીફિકેશન પહેલાં તાપમાન 94 ° સે સુધી વધારવાનો સમય 1 મિનિટથી ઓછો હોવો જોઈએ. તદુપરાંત, વિસ્તરણ તાપમાનને લગભગ 68 ° C પર સેટ કરવું અને 1 kb/min ના દર અનુસાર વિસ્તરણ સમયની રચના લાંબા ટુકડાઓના અસરકારક વિસ્તરણને સુનિશ્ચિત કરી શકે છે.

પ્ર: પીસીઆરની એમ્પ્લીફિકેશન વફાદારી કેવી રીતે સુધારવી?

ઉચ્ચ વફાદારી સાથે વિવિધ DNA પોલિમરેજનો ઉપયોગ કરીને PCR એમ્પ્લીફિકેશનનો ભૂલ દર ઘટાડી શકાય છે. અત્યાર સુધી મળેલા તમામ તાક ડીએનએ પોલિમરેજીસ પૈકી, પીએફયુ એન્ઝાઇમ સૌથી ઓછો ભૂલ દર અને સૌથી વધુ વફાદારી ધરાવે છે (જોડાયેલ કોષ્ટક જુઓ). એન્ઝાઇમ પસંદગી ઉપરાંત, સંશોધકો પ્રતિક્રિયાની સ્થિતિને optimપ્ટિમાઇઝ કરીને પીસીઆર પરિવર્તન દરને વધુ ઘટાડી શકે છે, જેમાં બફર કમ્પોઝિશન, થર્મોસ્ટેબલ પોલિમરેઝની સાંદ્રતા અને પીસીઆર ચક્ર નંબરને પ્ટિમાઇઝ કરવાનો સમાવેશ થાય છે.

તમારો સંદેશ અહીં લખો અને અમને મોકલો

ઉત્પાદનો શ્રેણીઓ

અમને શા માટે પસંદ કરો

તેની સ્થાપનાથી, અમારી ફેક્ટરી સિદ્ધાંતને વળગીને પ્રથમ વિશ્વકક્ષાના ઉત્પાદનો વિકસિત કરી રહી છે
ગુણવત્તા પહેલા. અમારા ઉત્પાદનોએ ઉદ્યોગમાં ઉત્તમ પ્રતિષ્ઠા મેળવી છે અને નવા અને જૂના ગ્રાહકો વચ્ચે મૂલ્યવાન વિશ્વાસ.

તપાસ