Operate ચલાવવા માટે સરળ: આ કીટ 2 × પ્રિમિકસ તરીકે પૂરી પાડવામાં આવે છે, અને પીસીઆર ફક્ત નમૂનાઓ અને પ્રાઇમર્સ ઉમેરીને કરી શકાય છે.
■ ઉચ્ચ વફાદારી: વફાદારી તાક પોલિમરેઝ કરતા 50 ગણી છે.
■ ઉચ્ચ વિશિષ્ટતા: ઉત્પાદનની વિશિષ્ટતાની ખાતરી કરવા માટે ઉત્તમ હોટ-સ્ટાર્ટ પ્રદર્શન ..
Amp ઝડપી વિસ્તરણ: વિસ્તરણ ઝડપ 10-15 સેકન્ડ/kb સુધી પહોંચી શકે છે.
Ext મજબૂત એક્સ્ટેન્સિબિલિટી: 20 kb સુધી DNA ટુકડાઓ વિસ્તૃત કરી શકાય છે.
Applic વ્યાપક ઉપયોગિતા: કીટમાં પીસીઆર એન્હેન્સર છે અને ઉચ્ચ જીસી અને જટિલ નમૂનાઓના વિસ્તરણ માટે યોગ્ય છે.
પ્રકાર: ઉચ્ચ વફાદારી ડીએનએ પોલિમરેઝ
એમ્પ્લીફિકેશન ઝડપ: 10-15 સેકન્ડ/કેબી
ટુકડાનું કદ: <20kb
એપ્લિકેશન્સ: હાઇ ફિડેલિટી પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશન, જનીન ક્લોનિંગ, હાઇ જીસી ટેમ્પલેટ એમ્પ્લીફિકેશન, જટિલ જીનોમનું જનીન ક્લોનિંગ, સીડીએનએ હાઇ ફિડેલિટી એમ્પ્લીફિકેશન, એસએનપી ડિટેક્શન, સાઇટ-વિશિષ્ટ પરિવર્તન, વગેરે.
વિવિધ છોડના પેશીઓમાંથી ડીએનએ નિષ્કર્ષણ ઉપજ:
નોંધ: DNA ઉપજ નમૂનાના પ્રકારો પર આધાર રાખે છે. ઉપરોક્ત તમામ સામગ્રી ટેન્ડર પાંદડામાંથી છે.
બધા ઉત્પાદનો ODM/OEM માટે કસ્ટમાઇઝ કરી શકાય છે. વિગતો માટે,કૃપા કરીને કસ્ટમાઇઝ સર્વિસ (ODM/OEM) પર ક્લિક કરો
ઉત્પાદનની વિશિષ્ટતાને સુનિશ્ચિત કરવા માટે હોટ-સ્ટાર્ટ આકૃતિ 1. એમ્પ્લીફિકેશન પ્રોડક્ટ્સની વિશિષ્ટતાને સુનિશ્ચિત કરવા માટે અલ્ટ્રા હાઇફાઇમાં ઉત્તમ હોટ-સ્ટાર્ટ ફંક્શન છે. મોલેક્યુલર બીકોન્સ પદ્ધતિ લાગુ કરવામાં આવી હતી (મા એટ અલ., ગુદા બાયોકેમ, 2006). |
|
ઉત્તમ ઉચ્ચ વફાદારી, તાક પોલિમરેઝ કરતા 50 ગણી વધારે આકૃતિ 2. અલ્ટ્રા હાઇફાઇની વફાદારી સામાન્ય તાક પોલિમરેઝ કરતા 50 ગણી વધારે છે. તાક પોલિમરેઝની પોલિમરાઇઝેશન વફાદારી (સુધારાત્મક પ્રવૃત્તિ વિના) સંદર્ભ તરીકે વપરાય છે. |
|
ઝડપી એમ્પ્લીફિકેશન અને લાંબા ટુકડાઓ ઝડપથી વધારી શકાય છે અંજીર 3. અલ્ટ્રા હાઇફાઇ 4 કેબી કરતા નાના ટુકડાઓ માટે 5 સેકન્ડ/કેબી સુધી લંબાવી શકે છે. લાંબા ટુકડાઓ માટે, એમ્પ્લીફિકેશન સમય યોગ્ય રીતે વધારી શકાય છે. 15 કેબીથી વધુ ટુકડાઓ માટે, હદ ઝડપ 30 સેકન્ડ/કેબી સુધી હોઇ શકે છે. M: TIANGEN D15000 માર્કર |
|
મજબૂત સાર્વત્રિકતા અને ઉચ્ચ વિશિષ્ટતા, ઉચ્ચ જીસી વાંચવા માટે સરળ અને વિવિધ સ્રોતોમાંથી લાંબા ટુકડાઓ આકૃતિ 4. વિવિધ પ્રકારના નમૂનાઓ માટે એમ્પ્લીફિકેશન સફળતા દર અને ઉત્પાદનની માત્રાને સુનિશ્ચિત કરવા માટે અલ્ટ્રા હાઇફાઇમાં ઉચ્ચ વિશિષ્ટતા છે. A. અલ્ટ્રા HiFi એમ્પ્લીફિકેશન પરિણામો B. સપ્લાયર K ના હાઇ-ફાઇ એન્ઝાઇમ એમ્પ્લીફિકેશન પરિણામો C. સપ્લાયર N ના હાઇ-ફાઇ એન્ઝાઇમ એમ્પ્લીફિકેશન પરિણામો M: TIANGEN D15000 માર્કર લેન 1-5. વિવિધ લંબાઈવાળા નમૂનાઓના એમ્પ્લીફિકેશન પરિણામો: 1. 750 bp; 2. 1 કેબી; 3. 2 કેબી; 4. 4 કેબી; 5. 6 કેબી લેન 6. ઉચ્ચ GC નમૂનાનું વિસ્તરણ પરિણામ: 1915 bp (GC%: 70%); લેન 7-11. વિવિધ જીનોમમાંથી 2 kb નમૂનાઓનું વિસ્તરણ પરિણામ: 7. ઉંદર; 8. ચોખા; 9. ઘઉં; 10. મકાઈ; 11. બેક્ટેરિયા; લેન 12-14. 8 kb લાંબા ટુકડા એમ્પ્લીફિકેશન પરિણામ: 12. ચોખા; 13. મકાઈ; |
A-1 ખાંચો
■ નમૂનામાં પ્રોટીન અશુદ્ધિઓ અથવા તાક અવરોધકો વગેરે છે DNA ડીએનએ નમૂનો શુદ્ધ કરો, પ્રોટીન અશુદ્ધિઓ દૂર કરો અથવા શુદ્ધિકરણ કીટ સાથે નમૂના ડીએનએ કાો.
Template નમૂનાનું વિકૃતિકરણ પૂર્ણ નથી den યોગ્ય રીતે વિકૃતિકરણ તાપમાનમાં વધારો અને વિકૃતિકરણનો સમય લંબાવવો.
■ ાંચો અધોગતિ the નમૂનો ફરીથી તૈયાર કરો.
એ -2 પ્રાઇમર
Pri પ્રાઇમર્સની નબળી ગુણવત્તા-પ્રાઇમરનું ફરીથી સંશ્લેષણ કરો.
■ પ્રાઇમર ડિગ્રેડેશન - ઉચ્ચ સાંદ્રતાવાળા પ્રાઇમર્સને બચાવવા માટે નાના વોલ્યુમમાં વહેંચો. બહુવિધ ઠંડું અને પીગળવું અથવા લાંબા ગાળાના 4 ° C ક્રિઓપ્રિઝર્વ્ડ ટાળો.
Pri પ્રાઇમર્સની અયોગ્ય ડિઝાઇન (દા.ત. પ્રાઇમરની લંબાઇ પૂરતી નથી, પ્રાઇમર્સ વચ્ચે ડીમર રચાય છે, વગેરે)
A-3 Mg2+એકાગ્રતા
■ એમજી2+ એકાગ્રતા ખૂબ ઓછી છે - એમજીમાં સારી રીતે વધારો2+ એકાગ્રતા: Mg ને પ્ટિમાઇઝ કરો2+ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા2+ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.
A-4 એનિલીંગ તાપમાન
Anંચું neનિલીંગ તાપમાન બાળપોથી અને નમૂનાના બંધનને અસર કરે છે. Neએનિલિંગ તાપમાન ઘટાડવું અને 2 ° C ના withાળ સાથે સ્થિતિને પ્ટિમાઇઝ કરવી.
A-5 વિસ્તરણ સમય
■ ટૂંકા વિસ્તરણ સમય extension વિસ્તરણ સમય વધારો.
ઘટના: નકારાત્મક નમૂનાઓ લક્ષ્ય ક્રમ બેન્ડ પણ દર્શાવે છે.
PCR નું A-1 દૂષણ
Target લક્ષ્ય ક્રમ અથવા એમ્પ્લીફિકેશન પ્રોડક્ટ્સનું ક્રોસ દૂષણ fully નકારાત્મક નમૂનામાં લક્ષ્ય ક્રમ ધરાવતા નમૂનાને કાળજીપૂર્વક પાઇપેટ ન કરો અથવા તેમને સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબમાંથી બહાર ફેંકી દો. હાલના ન્યુક્લિક એસિડને દૂર કરવા માટે રીએજન્ટ્સ અથવા સાધનો ઓટોક્લેવ્ડ હોવા જોઈએ, અને નકારાત્મક નિયંત્રણ પ્રયોગો દ્વારા દૂષણનું અસ્તિત્વ નક્કી કરવું જોઈએ.
■ રીએજન્ટ દૂષણ re રીએજન્ટ્સને અલગ કરો અને નીચા તાપમાને સ્ટોર કરો.
A-2 પ્રાઇમr
■ એમજી2+ એકાગ્રતા ખૂબ ઓછી છે - એમજીમાં સારી રીતે વધારો2+ એકાગ્રતા: Mg ને પ્ટિમાઇઝ કરો2+ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા2+ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.
■ અયોગ્ય પ્રાઇમર ડિઝાઇન, અને લક્ષ્ય ક્રમમાં બિન-લક્ષ્ય ક્રમ સાથે સમાનતા છે. -પ્રાઇમર્સ ફરીથી ડિઝાઇન કરો.
ઘટના: પીસીઆર એમ્પ્લીફિકેશન બેન્ડ અપેક્ષિત કદ સાથે અસંગત હોય છે, મોટા અથવા નાના, અથવા કેટલીકવાર બંને ચોક્કસ એમ્પ્લીફિકેશન બેન્ડ અને બિન-વિશિષ્ટ એમ્પ્લીફિકેશન બેન્ડ થાય છે.
એ -1 પ્રાઇમર
Pri નબળી પ્રાઇમર વિશિષ્ટતા
-ફરીથી ડિઝાઇન પ્રાઇમર.
■ પ્રાઇમર એકાગ્રતા ખૂબ વધારે છે ro યોગ્ય રીતે વિકૃતિકરણ તાપમાનમાં વધારો કરો અને વિકૃતિકરણ સમયને લંબાવો.
A-2 Mg2+ એકાગ્રતા
Mg ધ એમજી2+ એકાગ્રતા ખૂબ વધારે છે - Mg2+ એકાગ્રતાને યોગ્ય રીતે ઘટાડો: Mg ને imizeપ્ટિમાઇઝ કરો2+ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા2+ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.
એ -3 થર્મોસ્ટેબલ પોલિમરેઝ
En અતિશય એન્ઝાઇમ જથ્થો 0.5 0.5 યુના અંતરાલોમાં યોગ્ય રીતે એન્ઝાઇમની માત્રા ઘટાડવી.
A-4 એનિલીંગ તાપમાન
Ne એનિલીંગનું તાપમાન ઘણું ઓછું છે an યોગ્ય રીતે એનિલીંગ તાપમાનમાં વધારો કરો અથવા બે-તબક્કાની એનેલીંગ પદ્ધતિ અપનાવો
A-5 PCR ચક્ર
Many ઘણા બધા પીસીઆર ચક્ર - પીસીઆર ચક્રની સંખ્યા ઘટાડવી.
એ -1 પ્રાઇમરનબળી વિશિષ્ટતા-પ્રાઇમરને ફરીથી ડિઝાઇન કરો, તેની વિશિષ્ટતા વધારવા માટે પ્રાઇમરની સ્થિતિ અને લંબાઈ બદલો; અથવા નેસ્ટેડ પીસીઆર કરો.
A-2 ાંચો DNA
- નમૂનો શુદ્ધ નથી - નમૂનાને શુદ્ધ કરો અથવા શુદ્ધિકરણ કીટ સાથે ડીએનએ કા extractો.
A-3 Mg2+ એકાગ્રતા
—— એમજી2+ એકાગ્રતા ખૂબ વધારે છે - એમજીને યોગ્ય રીતે ઘટાડે છે2+ એકાગ્રતા: Mg ને પ્ટિમાઇઝ કરો2+ શ્રેષ્ઠ એમજી નક્કી કરવા માટે 0.5 મીમીના અંતરાલ સાથે 1 એમએમથી 3 એમએમ સુધીની પ્રતિક્રિયાઓની શ્રેણી દ્વારા એકાગ્રતા2+ દરેક નમૂના અને બાળપોથી માટે એકાગ્રતા.
A-4 dNTP
- dNTP ની સાંદ્રતા ખૂબ વધારે છે - dNTP ની સાંદ્રતા યોગ્ય રીતે ઘટાડવી
A-5 એનિલીંગ તાપમાન
Low ખૂબ ઓછું એન્નીલિંગ તાપમાન an યોગ્ય રીતે એનિલીંગ તાપમાનમાં વધારો
A-6 ચક્ર
- ઘણા બધા ચક્ર - સાયકલ નંબરને પ્ટિમાઇઝ કરો
પ્રથમ પગલું એ યોગ્ય પોલિમરેઝ પસંદ કરવાનું છે. નિયમિત તાક પોલિમરેઝ 3'-5 'એક્ઝોન્યુક્લીઝ પ્રવૃત્તિના અભાવને કારણે પ્રૂફરીડ કરી શકતું નથી, અને મેળ ન ખાવાથી ટુકડાઓની વિસ્તરણ કાર્યક્ષમતામાં ઘણો ઘટાડો થશે. તેથી, નિયમિત તાક પોલિમરેઝ 5 kb કરતા મોટા લક્ષ્ય ટુકડાઓને અસરકારક રીતે વિસ્તૃત કરી શકતું નથી. વિસ્તરણ કાર્યક્ષમતા સુધારવા અને લાંબા ટુકડા વિસ્તરણની જરૂરિયાતોને પહોંચી વળવા માટે ખાસ ફેરફાર અથવા અન્ય ઉચ્ચ વફાદારી પોલિમરેઝ સાથે તાક પોલિમરેઝ પસંદ કરવું જોઈએ. વધુમાં, લાંબા ટુકડાઓના એમ્પ્લીફિકેશન માટે પણ પ્રાઇમર ડિઝાઇન, ડિનેટરેશન ટાઇમ, એક્સટેન્શન ટાઇમ, બફર પીએચ, વગેરેને અનુરૂપ એડજસ્ટમેન્ટની જરૂર પડે છે. નમૂનાના નુકસાનને રોકવા માટે, ચક્ર દીઠ 94 ° C પર વિકૃતિકરણ સમય 30 સેકંડ અથવા ઓછો થવો જોઈએ, અને એમ્પ્લીફિકેશન પહેલાં તાપમાન 94 ° સે સુધી વધારવાનો સમય 1 મિનિટથી ઓછો હોવો જોઈએ. તદુપરાંત, વિસ્તરણ તાપમાનને લગભગ 68 ° C પર સેટ કરવું અને 1 kb/min ના દર અનુસાર વિસ્તરણ સમયની રચના લાંબા ટુકડાઓના અસરકારક વિસ્તરણને સુનિશ્ચિત કરી શકે છે.
ઉચ્ચ વફાદારી સાથે વિવિધ DNA પોલિમરેજનો ઉપયોગ કરીને PCR એમ્પ્લીફિકેશનનો ભૂલ દર ઘટાડી શકાય છે. અત્યાર સુધી મળેલા તમામ તાક ડીએનએ પોલિમરેજીસ પૈકી, પીએફયુ એન્ઝાઇમ સૌથી ઓછો ભૂલ દર અને સૌથી વધુ વફાદારી ધરાવે છે (જોડાયેલ કોષ્ટક જુઓ). એન્ઝાઇમ પસંદગી ઉપરાંત, સંશોધકો પ્રતિક્રિયાની સ્થિતિને optimપ્ટિમાઇઝ કરીને પીસીઆર પરિવર્તન દરને વધુ ઘટાડી શકે છે, જેમાં બફર કમ્પોઝિશન, થર્મોસ્ટેબલ પોલિમરેઝની સાંદ્રતા અને પીસીઆર ચક્ર નંબરને પ્ટિમાઇઝ કરવાનો સમાવેશ થાય છે.
તેની સ્થાપનાથી, અમારી ફેક્ટરી સિદ્ધાંતને વળગીને પ્રથમ વિશ્વકક્ષાના ઉત્પાદનો વિકસિત કરી રહી છે
ગુણવત્તા પહેલા. અમારા ઉત્પાદનોએ ઉદ્યોગમાં ઉત્તમ પ્રતિષ્ઠા મેળવી છે અને નવા અને જૂના ગ્રાહકો વચ્ચે મૂલ્યવાન વિશ્વાસ.